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說說大鼠心肌細(xì)胞H9C2的分離方法和質(zhì)量檢測

更新時(shí)間:2021-08-23 瀏覽次數(shù):1211

  大鼠心肌細(xì)胞H9C2是原始克隆細(xì)胞系的亞克隆,該細(xì)胞系從胚胎BD1X大鼠心臟組織獲得,并顯示出骨骼肌的許多特性。這個(gè)細(xì)胞株中的成肌細(xì)胞能融合形成多核的肌管,并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應(yīng)。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%,融合發(fā)生得很快。
  大鼠心肌細(xì)胞H9C2分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個(gè)器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心肌細(xì)胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀;細(xì)胞培養(yǎng)2h后開始貼壁,呈梭形;到12h左右,細(xì)胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;細(xì)胞分離培養(yǎng)48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細(xì)胞會出現(xiàn)搏動;心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點(diǎn),并具有自發(fā)性節(jié)律搏動,且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡便、定量、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn)。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié),研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué)、凋亡、受體下調(diào)、缺血預(yù)處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對其安全性進(jìn)行評價(jià)以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景,對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
  普諾賽(Procell)實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌細(xì)胞H9C2采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。普諾賽(Procell)實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometricactin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

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