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小鼠小膠質BV2使用小tips來了,請注意查收

更新時間:2023-06-16 瀏覽次數:1972

  小鼠小膠質BV2是從小鼠腦小膠質瘤中收集的,干冰運輸并轉移到液氮或-80度冰箱冷凍或收到后立即直接回收;存活的細胞在接收后應繼續生長,當傳代達到良好的細胞生長狀態時再進行冷凍。收到后,請檢查是否有漏液。先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,用酒精對瓶壁進行消毒,將T25瓶在37℃培養2-3H左右。
 
  離心后,除去上清液,加入6ml新的*培養基,重新加入原T25培養瓶。如果細胞長到90%,請及時進行細胞傳代,傳代應使用完整培養基。半貼壁細胞會黏附在瓶底,但黏附不緊密。輕輕吸取培養基,輕輕吹打細胞表面,細胞表面不經胰蛋白酶消化即脫落。推薦使用培養皿進行培養,更適合吹細胞。
 
  吹細胞時盡量輕柔,不要產生過多氣泡,以免影響細胞狀態。下面是小鼠小膠質BV2使用小tips,希望對你的使用會有所幫助。
 
  1、小鼠小膠質BV2呈半貼壁圓形或多角形,有的呈圓形懸浮狀。它們可以在傳代過程中收集和培養。更換溶液時,將懸浮的細胞離心收集,然后重新連接到原瓶中。如果貼壁細胞多,活性好,可以不用懸浮細胞;
  2、細胞對胰蛋白酶敏感。胰蛋白酶消化后,細胞形狀會更加紡錘形并變得緊密,不建議通過胰蛋白酶消化;
  3、細胞生長快,培養基消耗快。在培養過程中密切注意細胞狀態。當密度高,培養液趨于變黃時,及時更換溶液,避免細胞狀態變差;
  4、小鼠小膠質BV2細胞冷凍后,取出上清,用PBS洗滌,然后加入1ml胰蛋白酶。待細胞變圓脫落后,加入1ml培養基終止消化,用血細胞計數板計數;
  5、4min1000rpm離心去除上清液。加入1ml血清重懸細胞,根據細胞數加入血清和DMSO,輕輕混勻。DMSO終濃度為10%,細胞密度為1-2xe6/ml。每個冷凍保存管用1ml細胞懸液冷凍,注意凍存管的鑒別;
  6、將凍存管放入程序冷卻箱內,放入-80℃冰箱,至少2小時后轉入液氮沖洗保存。記錄低溫恒溫器的位置以備下次檢索。

小鼠小膠質BV2

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